




通过查询目标蛋白信息,一方面在明确实验目的、样品类型后,通过查询目标蛋白信息了解目标蛋白表达量及细胞定位情况,可以帮助我们更好地设计实验方案,例如:
目标蛋白表达量正常,是跨膜蛋白或核蛋白,想要验证蛋白的表达情况时,这类蛋白通常使用RIPA不易被提取,容易丢失在RIPA不可溶组分中(如下图),这类蛋白推荐使用对难溶性蛋白(如膜蛋白、核蛋白等)提取效率更高的Invent柱式法工具进行总蛋白提取。

目标蛋白在某个特定细胞器上(内质网,高尔基体,溶酶体,线粒体,内体等)表达,且蛋白丰度较低,提取总蛋白检测时条带较弱,则推荐使用Invent柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测,提高检出效率。
研究蛋白定位或研究蛋白转运过程,推荐使用Invent柱式法工具进行细胞组分分离,将样品分离为不同组分如分成细胞核,细胞浆,细胞器,细胞膜组分后分别检测。
除此之外,还可以帮助我们在WB实验出现问题时进行问题排查。例如:条带检测不到是否是因为目标蛋白表达量过低;出现多条带时,是否是因为其具有剪切体;条带分子量大小变化时,是否是形成了多聚体等。
综上所述,无论是WB实验方案设计还是排查WB问题排查,了解目标蛋白详细信息均起到重要的作用。若要了解更多WB问题解决方案及Invent柱式法蛋白快速提取/亚细胞结构分离工具,可随时联系我们~
天津舍为斯生物技术有限公司是国内领先的转化医学研究、生物医药研究、临床医学CRO(研发外包)研究的高新科技企业。公司致力于打造公共技术服务、生物医药研发和临床医学CRO服务为主体的三位一体健康医疗产业联盟。公司基于近10年的客户服务体验及技术经验积累,为基础科研、转化医学、新药研发等医药科研类客户提供专业化的技术服务及共享实验平台。公司拥有专业化的实验室及一流的实验设备,拥有独立的细胞培养室、分子生物学实验室,以及经认证的SPF级别的动物饲养中心。
开展的服务项目包括:siRNA合成、载体构建、病毒包装、细胞功能学实验、各类动物造模及后续分子和蛋白指标检测、各类组学服务和外泌体研究服务及个性化的整体科研服务项目等,更多详情请关注我们的微信公众号:天津舍为斯生物技术有限公司。
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