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2023 / 10 / 31
质粒元件拆解(二)——启动子解读
启动子篇启动子是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列，它含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列，多数位于结构基因转录起始点的上游,启动子本身不被转录。启动子作为RNA聚合酶和一些转录因子结合的靶序列，对转录起始有调节和控制作用，决定着基因表达过程的...
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2023 / 10 / 31
实验干货|如何用线粒体膜电位(JC-1)法做好细胞凋亡检测
细胞凋亡是指细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束生命，最后裂解为若干凋亡小体，被其他细胞吞噬的过程，也称为程序性细胞死亡。细胞凋亡检测有很多种方法，常见的有Caspase活性检测、Annexin V检测、线粒体膜电位检测、TUNEL检测等。细胞发生凋亡时，不同时...
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2023 / 10 / 20
细胞ROS水平常用检测试剂及方法
ROS水平的变化常被用作监测细胞铁死亡水平的指标。因此，针对不同的铁死亡效应，可采取多种ROS检测手段。细胞内的ROS可以通过荧光成像或流式细胞术使用荧光探针DCFH-DA，脂质ROS可通过C11-BODIPY等检测。ROS的荧光强度与铁死亡呈正相关。下面给大家分享两种探针的具体使用方法。DC...
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2023 / 10 / 20
实验干货|如何用Annexin V/PI法做好细胞凋亡检测
细胞凋亡是指细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束生命，最后裂解为若干凋亡小体，被其他细胞吞噬的过程，也称为程序性细胞死亡。细胞凋亡是多细胞有机体为调控机体发育、维护内环境稳定的方式，凋亡过程是由基因控制的细胞主动死亡过程。细胞凋亡从形态学观察...
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2023 / 10 / 18
腺相关病毒常见问题与解答——看这一篇就够了
1、为什么很少用AAV做细胞感染，而更适合做动物实验？因为AAV转染细胞的表达效率低，在没有辅助病毒或辅助因子的情况下，单链DNA变成双链DNA的过程十分缓慢；另外，体外细胞生长速度快，细胞中感染的AAV会随着细胞分裂不断稀释，进一步导致其表达水平降低。但在体内研究中，可以利...
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2023 / 10 / 18
质粒元件拆解——复制起点解读
质粒的复制起点——ORI复制起点（replicon）是使用质粒时必须要考虑的一个基本元件，它显著影响着质粒拷贝数，一种复制起点不一定能在所有生物体中行使其功能，使用质粒时需要对复制起点进行选择。1、复制起点复制起点由起始复制子（ORI）及其调控元件组成。ORI是DNA复制起始的位...
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2023 / 10 / 16
一文带你看懂慢病毒、腺病毒、腺相关病毒的区别和应用场景
以病毒为基础的基因载体，是一种常见的分子生物学工具，利用病毒载体可将目的基因传递至培养的细胞或是完整活体中。目前常用的病毒载体有慢病毒载体（Lentivirus Vector，LV），腺病毒载体（Adenovirus Vector，AdV）和腺相关病毒载体（Adeno-associated virus Vector）等。慢病毒...
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2023 / 10 / 16
告别一知半解，帮您全面认识质粒系统
一、什么是载体？1、把一个目的基因通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），主要目的是分离、纯化及表达特定的基因，此过程中需要运载工具（交通工具）携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫做载体（Vector）。2、基因工程上所用的载体是一类能自我复制的DNA分子，其中...
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2023 / 10 / 07
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2023 / 10 / 07
干货分享 | 细胞培养通关宝典
一、细胞培养的概念20世纪初才创立的一种研究动物细胞行为的方法。细胞培养是指从体内组织取出细胞模拟体内出现环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。二、细胞培养的应用1. 药物研究与开发 (1) 新药筛选 (2) 疫...
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